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本生資料推薦—茜素紅S染色液配制方法及染色原理
茜素紅S是橙黃色的針狀體。溶于水,微溶于醇,不溶于氯仿和苯。1%水溶液pH2.15。由茜素經發(fā)煙硫酸磺化,然后轉變?yōu)殁c鹽制得。屬一種蒽醌(Anthraquinone)類的衍生物,是茜素磺酸鈉鹽,它能與鈣鹽以鰲和方式形成復合物,用以識別組織細胞的鈣鹽成分。鈣鹽變化是骨細胞增殖分化和骨組織成骨潛能的標志之一。通過茜紅素染色,產生橘紅色沉積。
原理:茜素紅S(Alizarin Red S)鈣染色法是一種旨在通過鰲和技術,使鈣離子和茜素紅S產生復合物,來分析固定處理的細胞樣本中橘紅色鈣沉積現(xiàn)象的而經典的技術方法。主要適用于動物原生代或培養(yǎng)細胞的鈣沉積和鈣化結節(jié)檢測。廣泛用于骨細胞或組織病理生理的研究。
用途:絡合滴定指示劑和酸堿指示劑。茜素紅能和許多金屬離子生成穩(wěn)定的紅色絡色物,在分析中常用作金屬指示劑;光度法測定金屬離子的顯色劑;在分析中常用作金屬指示劑;光度法測定金屬離子的顯色劑;酸堿指示劑,第一變色范圍PH值3.7(黃)~5.2(紫),第二變色范圍PH值10.1(紫)~12.0(淺黃);用于極譜法測定金屬離子。
配制方法:將托盤天平上稱取0.1g茜素磺酸鈉定溶于100ml蒸餾水中轉移入滴瓶中,貼標簽備用。 或用茜素紅粉加PBS溶解后,要注意調節(jié)PH值到7.2過濾就可以了。0.1%的茜素紅Tris-HCL(PH8.3), Tris的濃度做分子生物學一樣的,用0.Imol/L的HCI或0 1%的NaOH調節(jié)。
保存:常溫保存,有效期6個月。
茜素紅S染色液 注意事項:
1.試劑溶液在樣品表面時,避免有氣泡存在,同時確保鋪滿樣品表面。
2.茜素紅S染色時間根據(jù)鈣鹽的含量來確定??稍陲@微鏡下面觀察,見鈣鹽成較深的橘紅色即取出洗滌,如染色液時間過長,可能出現(xiàn)彌散現(xiàn)象。
3.為了您的健康和安全,請穿實驗服并佩戴一次性手套操作。
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